什么是外泌体？

外泌体是由细胞分泌到胞外的大小在30-150nm的纳米级膜性囊泡。其携带多种RNA、DNA片段及蛋白等成分，能够在细胞与细胞间传递物质及信号。其主要来源于细胞内体膜内陷形成的多囊泡体，经多囊泡体外膜与细胞膜融合后释放到胞外基质中 。

所有培养的细胞类型均可分泌外泌体，且外泌体天然存在于各种体液中，包括血液、唾液、尿液、脑脊液和乳汁中。同时在植物中也分离有外泌体(Ju, et al. 2013)。

图1. 外泌体模式图

外泌体提取

当前外泌体分离中遇到的困难

外泌体提取方式多样，其中通过密度梯度离心能够得到纯度较高的外泌体，但会面临以下问题：

1、传统差速离心，超速离心分离外泌体容易导致外泌体聚集及变形。

2、使用CsCl密度梯度离心会因高浓度分子导致高的渗透压，破环外泌体结构完整性。

3、使用蔗糖、甘油或OptiPrep进行密度梯度离心导致较难除去这些介质的干扰，且粘度也较大，操作流程也较复杂。

对于发表在Cell、Nature、Science等高质量杂志上的外泌体提取方法大多都是使用的超速离心获得外泌体。使用超速离心提取外泌体是目前获得外泌体纯度最高的方法，但纯度也仅为77%（Tian, et al. 2020），而我们通过使用外泌露（货号：EXO-008）提取的外泌体纯度可以达到95%以上。

外泌露的特点：

1、分子量小

2、渗透压低

3、低粘度

4、可形成连续密度梯度

外泌露应用的优势

使用外泌体露能够解决上述外泌体分离过程中遇到的难点问题，得到纯度高且结构完整的外泌体：

1、超速离心过程中，外泌露作为缓冲垫可以得到完整的外泌体。

2、外泌露低渗透压可以有效维持外泌体的结构。

3、外泌露粘度低、安全无任何毒性、可通过简单的透析去除。

4、外泌露可在短时间内形成密度梯度，操作流程简单。

图2. 外泌露使用模式图

样品提取类型

参考文献

1、Ju Songwen,Mu Jingyao,Dokland Terje et al. Grape exosome-like nanoparticles induce intestinal stem cells and protect mice from DSS-induced colitis.[J] .Mol. Ther., 2013, 21: 1345-57.

2、Tian Ye,Gong Manfei,Hu Yunyun et al. Quality and efficiency assessment of six extracellular vesicle isolation methods by nano-flow cytometry.[J] .J Extracell Vesicles, 2020, 9: 1697028.

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